死區時間 保留時間 固定液體體積 如何找到分配因子

一般來說，沒有保留在流動相中的組分，出現的第乙個峰值就是死區時間。 因此，死體積=死區時間x流速。

死區時間（t0）是液相色譜法中的乙個重要引數，準確測定其值對於優化分離條件和色譜熱力學研究具有重要意義。 在反相色譜中，固定相的極性較小，流動相一般為水、甲醇、乙腈等，極性較強，因此通常採用極性較強的nano3或NH4NO3作為測定死區時間的標記物。 然而，由於標記物和固定相之間的相互作用，測量結果會偏離真實的死亡時間。

通常，當反相液相色譜中使用高極性溶質（如 nano3）測定死區時間時，其與固定相的相互作用可以忽略不計。 該方法得到的死區時間可進一步用於色譜保留機理的熱力學研究和分離條件的優化。

死區時間是HPLC中非常重要的基本引數。 它是優化色譜條件和定性鑑定所必需的。

液相色譜的基本理論與氣相色譜相同，但液相色譜系統與氣相色譜系統有很大不同，如液體的擴散係數和物料顆粒的孔體積，以及堆積顆粒之間的孔體積，因此影響死區時間的因素也比氣相色譜複雜得多。

色譜法中通常有兩種確定死區時間的方法，一種是直接測定所謂的無保留探針，如尿嘧啶、D2O、某些無機鹽等; 第二種是根據同系物的保留時間，用數學方法計算死亡時間。

確定死區時間的最簡單方法：

液-液色譜死區時間：用Naci、nano3、Hno3、HCIO3、苯甲酸、苦味酸、尿嘧啶水溶液反相測量死區時間，但測定誤差較大。 死亡時間用全氯乙烯和四氟乙烯測量。

附文1）一種反相液相色譜法中死區時間測定的新方法 2）反相高效液相色譜法中死區時間的測定。

1、A.容量係數：又稱分配比、容量比、分配容量。 它是衡量色譜柱保留分離組分能力的重要引數，用 k' 表示。

k' 定義為在固定相和流動相中分布的組分的量（重量、體積或克分子）的比率，用公式表示為：

其中K是分配因子，Vs是固定相（分配色譜）的體積、表面積（吸附色譜）、孔體積（排阻色譜）或交換容量（離子交換色譜），VM是色譜柱中流動相的體積。 k'的值越大，保持柱子內的強度;相反，保留率較弱; 如果 k' = 0，則組分不會保留在固定相上，測得的保留體積 （VM） 為死體積 （VM）。 請參閱死體積條。

體積係數 = 固定體積是。

b.分配係數：指在平衡的一定溫度下，固定相中組分的濃度與流動相中的濃度之比，用k表示。 它是分配色譜中的乙個重要引數，與固定相和流動相的體積無關，而僅與溫度有關。

在一定溫度下，每個組分對於乙個固定相和流動相都有一定的分配係數，如果兩個或兩個以上組分的分配因子相同，那麼它們就無法相互分離，色譜峰會完全重疊，反之，兩個或多個組分的分配係數越不同， 相應的色譜峰將更好地分離。

2.A.死體積（VM）：死體積未通過色譜柱保留的組分所消耗的流動相體積，可由死區時間確定：死體積原指色譜柱中未被固定相佔據的空隙體積，即色譜柱中流動相的體積。

但在實際測量中，它包括柱外死體積（色譜儀中管路和聯結器之間的空間以及進樣系統和檢測器之間的空間）。 當色譜柱外的體積很小時，可以忽略不計。

vm = 載氣的死區時間和平均流速。

b.保留體積：從進樣開始到色譜柱後組分的最大濃度，流經分離樣品組分的流動相體積，即流動相從進樣開始到組分色譜峰頂點的體積， 在 VR 中表達，通常以毫公升 （ml） 表示。預留卷 vr 與保留時間 tr 的關係如下：

其中Fo是色譜柱出口處流動相的流速，單位為ml min（保留體積=保留時間是載氣的平均流速。

c.調整後的保留體積：又稱表觀保留體積，組分調整後的保留體積是指從死體積中減去組分的保留體積（見死體積條）後的差值，用v'r表示，單位為ml。 調整預留卷、預留卷和死卷之間的關係，如下所示：

調整保留量 =

保留時間和死區時間是氣相色譜法的常用術語。

保留時間和死區時間之間的差值稱為校正保留時間。 以 VD 表示。

分配係數是固定相和流動相中組分在一定溫度和壓力下的平衡濃度之比。

保留時間是指組分從進樣開始到色譜柱後出現濃度最大所需的時間。

在相同條件下，如果兩種組分的分配系數值相等，且保留時間相等，則如果兩種組分的分配係數不同，則將分配係數不同的組分集中在流動相中，先分離色譜柱，保留時間短。

保留值受溶質的分子結構、烷基鍵合固定相的性質和流動相的性質的影響。

1.溶質的分子結構。

在反相鍵合相色譜中，溶質的分離是基於其疏水結構的差異，溶質的極性越弱，疏水性越強，保留值越大。 根據疏水理論，溶質的保留值與其分子非極性部分的總表面積有關，它與烷基鍵合固定相形成的面積越大，保留值越大。

2.烷基鍵合固定相的特性。

烷基鍵合固定相的作用是提供非極性表面的相互作用，因此與矽膠表面鍵合的烷基數量決定了溶質容量因子的大小。 烷基的疏水效能隨著碳鏈的延長而增加，溶質的保留值也隨著烷基碳鏈長度的增加而增加。

隨著烷基碳鏈的生長，配體相非極性作用的表面積增大，這不僅影響溶質保留值，而且影響色譜柱的選擇性，即隨著烷基碳鏈的延長，其對溶質分離的選擇性也隨之增加。

3.流動相特性。

流動相的表面張力越大，介電常數越大，其極性越強，溶質與烷基鍵合相的締合能力越強，流動相的洗脫強度越弱，導致溶質的保留值越大。

分配比或容量係數 = 分配係數 將流動相的體積比與固定相的體積比進行比較---已知可以計算體積因數或分配比。 分配比（容量因子）=調整保留時間死區時間，死區時間可以從流動相的正體積流速計算出來，這樣我們就知道保留時間調整好了，保留時間=調整後的保留時間+死區時間，保留時間乘以流速就是保留體積。

流動相的極性大於固定相的極性，稱為反相色譜，其中甲醇的極性小於水的極性，而甲醇的比例增加，即流動相的極性降低，因此容量因數（固定相中組分的質量與平衡狀態下的流動相的質量之比）變大， 並且保留時間增加。

保留值可以用保留時間來表示;

相對保留時間需要用到相對保留時間，相對保留時間=保留時間-死區時間。

這種死區時間校準品取決於流動相的選擇，在色譜中測定死區時間通常有兩種方法，一種是直接測定所謂的無保留探針，如尿嘧啶、一些無機鹽等; 第二種是根據同系物的保留時間，用數學方法計算死亡時間。

當輸入流動相時，第乙個基線波動時間是死區時間。

色譜法又稱色譜法或色譜法，是一種理化分析方法，它利用不同溶質（樣品）與固定相和流動相之間的力差（分布、吸附、離子交換等）。 它的英文名稱是：chromatography源自希臘語chroma和graphein，直譯成英文為color and writing; 直譯成中文為色譜法。

但有些人將其解釋為色譜法或色譜法。

在色譜法中，固定相（固相或液相）稱為固定相; 移動相（通常是氣相或液體）稱為流動相。

氣相稱為氣相色譜，液相稱為液相色譜。

離子色譜法：狹義：

它是一種液相色譜法，使用低交換容量的離子交換樹脂分離固定的相對離子物質，並用電導檢測器連續檢測流出物的電導變化。

廣義定義：液相色譜法，利用待測物質的離子性質進行分離和檢測。

所以離子色譜法實際上是液相色譜法的一種。

質譜法是一種分析方法，用於分析被測樣品離子的質荷比。 首先對待分析的樣品進行電離，然後根據質荷比（m z）對離子進行分離，利用不同離子在電場或磁場中的不同運動行為得到質譜，通過樣品的質譜和相關資訊可以得到樣品的定性和定量結果。

簡單來說，色譜法是分離物質的方法，質譜法是檢測的方法。

一般來說，色譜法採用電導率檢測器或UV檢測，牛B檢測採用質譜法。

lz這個問題是錯的，氣相色譜和質譜是兩種不同的分析方法，說氣相色譜質譜是錯的也是錯誤的。

除了質譜法是電化學分析方法（其他三種是色譜分析方法）而不能與其他三種方法比較外，其他三種方法最根本的區別是流動相，而氣相色譜法是一種氣體，由分析組分和流動相之間的吸附能力差異來隔開。

液相色譜是一種液體，分離原理是利用兩相中要分離的各種物質的不同親和能力，如分配係數和吸附能力。

離子色譜法是一種高效液相色譜法，其流動相為電解質溶液，而離子色譜法主要利用離子交換基團之間的交換，即離子之間的親和力差進行離子交換樹脂分離。

這是最籠統的說法，我和我做了詳細的對比，手寫的5頁A4紙，所以以上只是最基本的。

如果還不知道，可以去朱明華主編的《工具分析》第四版，大概可以看一下每章的前兩節來介紹一下。