High One Biology，關於綠葉中色素的提取和分離

乙醚的揮發性和毒性更大，重要的是要知道乙醚被用作麻醉劑。 同樣重要的是要注意，顏料在醚中的溶解度大於在醇中的溶解度。 如果採用乙醚萃取，畫線時紙上的顏料過多，色譜後分離不明顯。 歡迎

色譜溶液中四種色素在葉綠體中的擴散速率不同，色譜溶液的主要成分是石油醚，石油醚是一種非常脂溶性的有機溶劑，四種色素在葉綠體中對石油醚的溶解度不同：溶解度最高的是胡蘿蔔素，在濾紙上與石油醚擴散最快; 葉黃素和葉綠素a的溶解度是次要的; 葉綠素b的溶解度最低，擴散最慢。 這樣，幾分鐘後，四種顏料在擴散過程中被分離。

石油醚通常是危險的。

酒精比平時更常見。

1、分離原理：紙色譜法是以極性相似和溶解原理為基礎，以濾紙纖維的結合水為固定相，以有機溶劑為流動相。 由於樣品中每種物質的分配係數不同，擴散速度不同，從而達到分離的目的。

2、萃取原理：用有機溶劑萃取，再經過濾、真空濃縮和真空乾燥精製而得最終產品。 用於提取顏料的溶劑根據顏料的性質和所用的原料有不同的選擇，常用的是水、酸鹼溶液、有機溶液，如乙醇、丙酮、烷烴、苯等、油和二氧化碳。

顏料的作用：葉綠體中的色素分為兩類。 一種是可以吸收和傳輸光能的色素，包括大部分葉綠素a、所有葉綠素b、所有胡蘿蔔素和葉黃素。

另一類是少量處於特殊狀態的葉綠素a，它不僅可以吸收光能，還可以轉換光能，即將光能轉化為電能。 因此，合成葉綠體色素的作用是吸收、轉移和轉換光能。

顏料的提取和分離採用紙層析法完成。

實驗現象如下：

1.紙膠帶上會有四個顏料帶，因為不同的挖掘顏料在色譜溶液中的溶解度不同。 在色譜溶液中的溶解度大，隨色譜迅速上公升，因此四種顏料會分離。

2.色素帶的寬度不同，因為在植物細胞中，色素含量不同，色素越多，色素帶越寬。

如下：

1）實驗原理：可用有機溶劑無水乙醇提取綠葉中的色素，分離色素的原理是利用色素在色譜溶液中的溶解度不同，高溶解度在濾紙上的擴散速度快，反之則慢。

2）實驗結果：色譜分析後，濾紙條上會出現四個色素帶，色素從上到下分布為胡蘿蔔素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，色素條帶最寬的顏色為藍綠色，最窄的顏色為橙黃色。

3）綠葉中的色素分布在葉綠體的類囊體膜中。

基本介紹

葉綠素是植物光合作用的主要色素，是位於類囊體膜中的含脂色素家族。 葉綠素吸收大部分紅光和紫光，但反射綠光，所以葉綠素是綠色的，它在光合作用的光吸收中起著核心作用。 葉綠素是一種鎂卟啉化合物，包括葉綠素a、b、c、d、f、原葉綠素和細菌葉綠素。

葉綠素不是很穩定，遇光、酸、鹼、氧、氧化劑等會分解。 在酸性條件下，葉綠素分子容易失去卟啉環中的鎂，變成脫鎂葉綠素。 葉綠素具有抗癌、抗菌、抗氧化等作用，可用於醫療、食品、化妝品等行業。

不，不是說在層析溶液中溶解度大，跑得快，濾紙條從上到下是胡蘿蔔素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，就是執行的速度，從上到下從快到慢，但溶解度從大到小是：葉綠素a， 葉綠素B，葉黃素，胡蘿蔔素。

因此，如果您的陳述有問題，原因並不重要。

希望對你有所幫助。

溶解度大，即溶解速度快，用量大，所以擴散快。 你明白這一點嗎？

高顏料溶解度是指在有機溶劑中的高溶解度。 只有溶解在有機溶劑中的顏料才能隨有機溶劑遷移。

葉綠素提取的準備工作應在室溫下保持在25°C的半暗室中。

提取步驟如下：

1） 取 1000 克新鮮綠葉，在韋氏攪拌器中壓碎。

2）將1000克碾碎的綠葉放入丙酮中，加少量碳酸鈣（溫度20）提取，直至過濾洗滌後的葉片無色。

3）將過濾後的丙酮提取物放入含有1公升石油醚和100毫公升丙酮的漏斗中，然後在加入蒸餾水的同時輕輕旋轉，直至分層。水層中的大部分丙酮和水溶性雜質被丟棄，只留下石油醚溶液。

4）石油醚溶液用蒸餾水再次提純後，用含石油醚和草酸的80%甲醇溶液200ml洗滌5次以上，最後得黃綠色懸浮液。

5）將懸浮液用無水硫酸鈉乾燥，浸潤成3cm厚的蔗糖粉製成的柱中，再用石油醚洗滌沉澱的色素，除去類胡蘿蔔素，使其只含有天然葉綠素。

6）含有天然葉綠素的蔗糖柱分為兩層，綠色層有4-10公釐的葉綠素b層，另一層藍色層有2-6公釐的葉綠素一層。

7）將位於藍色層中間的部分（約佔藍色層的一半）放入乙醚中，過濾洗脫懸浮液，用蒸餾水洗滌，用硫酸鈉乾燥，再用器皿過濾，得到葉綠素a。

8）除去（6）中綠色層的中間部分，迅速放入乙醚中過濾洗脫，製成葉綠素乙醚溶液。

1、新增二氧化矽的原因：有利於充分研磨。

2.新增碳酸鈣的原因：防止顏料破壞。 研磨時，溶酶體會被破壞，溶酶體中的有機酸會流出，色素中含有鎂，碳酸鈣能與酸發生反應，阻止酸與鎂的反應，破壞色素。

3、新增無水乙醇的原因：光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑，綠葉中的光合色素可以用無水乙醇提取。

4、色譜溶液的作用：光合色素可溶於色譜溶液，不同的光合色素在色譜溶液中的溶解度不同。 高溶解度的光合顏料隨色譜溶液在濾紙上迅速擴散; 溶解度低的光合顏料在濾紙上緩慢擴散。

這樣，最終不同的光合色素在擴散過程中被分離出來。

在提取光合色素的過程中，關鍵是要快。 由於光合色素是脂溶性的，丙酮易揮發，有一定的毒性，所以提取過程要快，同時要用一張紙蓋住，防止其揮發; 在研磨過程中加入二氧化矽可以增加研磨時的摩擦力，加快研磨速度，同時使研磨充分，提取更多的顏料; 由於葉綠素容易被破壞，因此需要新增碳酸鈣以防止葉綠素被破壞; 切碎綠葉的目的也是為了加快研磨速度。

畫出一條細小的濾液線是本實驗獲得清晰結果的關鍵。 濾液線第一次必須完全乾燥後才能畫出第二條線，重複次數可以更多，濾液線應均勻、細、直。

首先，有必要了解原理：葉綠素能夠溶解在丙酮酸中。 還有乙個事實是，葉綠體中的色素在色譜中具有不同的溶解度：

高溶解度擴散快，低擴散慢。 了解了原理後，就該選擇材料了。 然後加入新鮮的綠葉，如菠菜葉，並加入 5mol 丙酮進行快速徹底研磨。

最後，過濾，畫過濾線，記得多畫幾遍過濾線，遵循直直的原則。

劃線時，將劃線對折不壓平，用提取液對折。此外，可以省去過濾步驟，可以選擇材料作為紅花階梯木，您將有新的發現。

不要避光，選擇揮發性低的溶劑，以減少顏料的降解。