尋求基因組DNA提取方案，完整，謝謝！！

人體細胞 - 稀鹽酸破壞細胞膜（內容物流出），然後離心。

DNA提取主要有CTAB法，其他方法包括玻璃珠法、超聲波法、研磨法、洞穴凍融法等物理方法。 化學方法如異硫氰酸胍法、鹼裂解法等。 生物方式：

酶法。 根據核酸分離純化方法的不同，有矽質材料、陰離子交換樹脂等。

主要分類： 真核DNA、細菌DNA、病毒DNA、質粒DNA、細胞懸浮DNA、組織DNA。

雙股環、雙股線性、單股環。

細胞核DNA、細胞器DNA

提取原理。 1.確保核酸一腳封閉級結構的完整性;

2.不應有有機溶劑抑制核酸樣品中橡膠裂紋高的酶和金屬離子。

3.應儘量減少其他生物大分子（如蛋白質、多醣和脂質分子）的汙染;

4.其他核酸分子，如RNA，也應盡可能去除。

樣品製備。 生物組織。

一。 如果不能立即提取，最好儲存新鮮組織，-70或液氮。

二。 液氮凍結、壓碎和研磨。

三。 組織均質法。

四。 液氮均質法。

1.解決方案 I — 裂解液：

溶菌酶：它是一種糖苷水解酶，能水解肽聚醣中的-1,4糖苷鍵，肽聚醣是細菌細胞壁的主要化學成分，因此具有裂解作用。 當溶液中的pH值小於8時，溶菌酶的作用受到抑制。

葡萄糖：增加溶液的粘度，保持滲透壓，防止DNA被機械剪下力降解。

EDTA：1）螯合Mg2+、Ca2+等金屬離子，抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解（DNase過程中需要一定的金屬離子作為假體基團）;

2）EDTA的存在有利於溶菌酶的作用，因為溶菌酶的反應需要離子強度低的環境。

2.溶液II-NaOH-SDS溶液：NaOH：

核酸在pH值大於5且小於9的溶液中穩定。 但是，當pH值>12或pH<3時，會引起雙鏈間氫鍵的解離和變性。 溶液II中NaOH的濃度是系統的pH值與加入提取物時一樣高，從而促進染色體DNA和質粒DNA的變性。

SDS：SDS是一種離子表面活性劑。 其主要功能是：

1）溶解細胞膜上的脂質和蛋白質，從而溶解膜蛋白並破壞細胞膜。

2）細胞中核蛋白的解聚。

3）SDS可以與蛋白質結合成為R-O-SO3-...R+-蛋白質複合物，使蛋白質變性並沉澱。 然而，SDS抑制核糖核酸酶的作用，因此必須在提取過程中將其去除，以防止下一步（使用RNase去除RNA時）的干擾。

3.溶液III - 3mol L Naac（溶液：

NAAC的水溶液是鹼性的，為了將pH值調節到pH值，必須加入大量的冰醋酸。 因此，該解決方案實際上是NAAC-HAC的緩衝區。 使用的NaAC溶液是將提取物的pH值恢復到中性，使變性的質粒DNA可以重新摺疊並穩定。

3mol L NaAC的高鹽有利於變性大分子染色體DNA、RNA和SDS-蛋白複合物的縮合和沉澱。 前者相互聚合，因為它中和了核酸上的電荷並降低了排斥力。

這種生物的大部分詞語都來自西班牙，這意味著一切都是由細胞組成的。

您好，很高興能夠為您回答這個問題。 原理：從細胞中分離出的DNA是與蛋白質結合的DNA，蛋白質中還含有大量的RNA，即核醣核蛋白。

如何有效地分離這兩種核蛋白是該技術的關鍵，而鹽洛喬法是DNA提取的常規技術之一。 在核酸的製備中，通常通過研磨破壞細胞壁和細胞膜，從而釋放核蛋白。 DNA不溶於RNA核蛋白，RNA核蛋白可溶於RNA，需要進一步去除蛋白質等雜質，使用Naci溶液從樣品破碎的細胞液中分離DNA和RNA核蛋白。

除去蛋白質的方法有3種，用含有辛醇或異戊基的氧仿振盪核蛋白溶液進行乳化，然後離心除去變性蛋白，用這種方法處理時，蛋白質停留在水相和氯仿相之間，DNA溶解在上層水相中，DNA的鈉鹽可用兩倍體積的95%乙醇溶液沉澱。 十二烷基硫酸鈉（SDS）等洗滌劑用於使蛋白質變性，以將其與核酸分離，也可以直接從材料中提取DNA。 將DNA溶解在上層水相中，蛋白質變性後停留在酚層中，吸出上層水相，加入兩倍體積的95%乙醇，得到白色纖維狀DNA沉澱。

反覆使用上述方法對DNA核蛋白溶液進行多次處理，可以更徹底地去除蛋白質等雜質，得到更純淨的DNA產物，本實驗中採用CTAB方法從植物幼苗中提取基因組DNA為了徹底去除DNA產物中受汙染的RNA雜質，可以使用RNA酶，生物材料中含有大量的脂質控制物質和多醣，當核蛋白在鹽溶液中分離並用乙醇或異丙醇分餾時，可以將其去除。 核酸純化目標：

純化的核酸樣品中不應存在抑制酒精的有機溶劑和過高濃度的重金屬離子：應儘量減少蛋白質、多醣和脂質分子等其他生物大分子的汙染：應排除RNA分子汙染。

希望對您有所幫助，簡單原理：原理：1

溶解在NAC1溶液中的沉澱物用冷醇萃取，雜質較少的沉澱在沸水浴中用二苯胺染成藍色。

這是一種非常高階的科學知識，在生物體內，它們都是基於細胞膜、細胞質等物質，然後可以通過分離來解除。

從植物組織中提取基因組DNA

1.材料。 嫩葉。

2.裝置。 移液器，冷凍高速離心機，台式高速離心機，水浴，陶瓷研缽，50ml離心管（帶蓋）和5ml離心管，彎曲成鉤的小玻璃棒。

3.試劑。 1. 提取緩衝液：100 mmol ltris·cl，，20 mmol ledta，500 mmol lnacl，.

2.提取緩衝液：葡萄糖、二硫代碳酸二乙酯、240ul巰基乙醇，加水至300ml。

4：16 氯仿：戊醇：乙醇。

4.RNA SEA母液。

5.其他試劑：液氮、異丙醇、TE緩衝液、無水乙醇、70%乙醇、3mol LNAAC。

四、操作步驟：

1.將20ml提取緩衝液加入50ml離心管中，並在60ml水浴中預熱。

2.幼苗或葉5-10g，切碎，在研缽中加入液氮研磨成粉，立即倒入預熱的離心管中，劇烈搖晃混合，60水浴保溫30-60分鐘（時間長，DNA產率高），不時搖勻。

3.加入氯仿戊醇乙醇溶液20ml，倒置混合（需戴手套防止損壞**），室溫靜置5-10分鐘，使水相和有機相分層（必要時重新混合）。

4.在室溫下以5,000rpm離心5分鐘。

5.小心地將上清液移液到另乙個50ml離心管中，加入1體積的異丙醇，充分混合，並在室溫下放置片刻，以出現絮狀DNA沉澱。

6.將 1 mlte 新增到 . 用帶鉤的玻璃棒去除DNA絮凝體，將其吸乾在乾淨的吸水紙上，然後將其轉移到含有Te的離心管中，DNA在Te中迅速溶解。

7.如果 DNA 不形成絮凝沉澱物，則可以使用 5000 rpm 離心 5 分鐘將沉澱轉移到 TE 管中。 這樣收集的沉澱通常難以溶解在TE中，可以在60水浴中放置15分鐘以上以幫助溶解。

8.將DNA溶液以3,000rpm離心5分鐘，並將上清液倒入乾淨的5ml離心管中。

9.加入5 lRNA sea（10g L）37 10分鐘以除去RNA（RNA通常對DNA操作和分析沒有影響，此步驟可以省略）。

10.加入 1 10 體積的 3mol LNAAC 和 2 體積的冰乙醇，充分混合，-20 並放置約 20 分鐘，DNA 形成絮凝沉澱物。

11.用玻璃棒取出DNA沉澱，用70%乙醇沖洗，然後在乾淨的吸水紙上吸乾。

12.將DNA重新溶解在1mlTe，-20中並儲存。

13.取 2 個 LDNA 樣品並在凝膠上電泳以檢測 DNA 的分子大小。 同時，將15 L稀釋20倍，測定OD260 OD280檢測DNA含量和質量。

注] 5 g 樣品保證 500 g DNA，足以用於 RFLP、PCR 等。

DNA提取主要以CTAB法為主，其他方法包括玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法等物理方法。 化學方法如異硫氰酸胍法、鹼裂解法等。 生物方式：

酶法。 根據核酸分離純化方法的不同，有; 矽質材料、陰離子交換樹脂等

提取基因組DNA和核DNA是提取細胞核的另一種方法，首先要打破細胞並分離細胞核，在甘油或其他保護劑中進行SDS十二烷基磺酸鈉：它可以破壞細胞膜，核膜，並將組織蛋白從DNA中分離出來 CATb是一種提取溶液，破壞細胞膜 特別忘記DNA不溶於異丙醇， 異丙醇能使DNA沉澱，產生白色絮狀沉澱物，用移液管挑出。

以下是一些具體方法，希望能有所幫助。