細胞貼壁體不理想，為什麼貼壁細胞不會在體內單層生長

一般來說，漂浮細胞是死細胞。

如果確定漂浮細胞是活的，則細胞附著可能存在問題，可以通過在培養系統中新增適量的粘附和擴散因子來改善粘附條件。

如果確定漂浮細胞已經死亡，則與細胞的生長狀態有關。 通過頻繁更換培養基、頻繁通過等方式，可以改善細胞的生存狀態。 如有必要，您可以嘗試不同的培養基。

當然，也應該排除細胞是否感染了支原體、病毒和黑膠蠕蟲。 由於這些感染不會導致大量細胞同時死亡，因此它們的影響會在一段時間後慢慢顯現出來。

對於消化，胰蛋白酶消化一般為1-5min。 這取決於你培養的細胞的貼壁能力，可以用相差顯微鏡觀察，如果你發現細胞是圓形的，則說明消化良好。 最好輕吹。

細胞不貼壁的原因太多了，養的兩類細胞也不需要新增貼壁因子，對消化時間和吹氣強度也沒有太嚴格的要求。 首先檢查你的培養基是不是正品（親身體驗，假培養基會殺人），然後你可以換乙個品牌的培養瓶或培養板（如果你有錢，建議用nuck），再看看有沒有汙染，但這些檢測試劑盒通常要花很多錢， 而且真的沒有辦法換到其他實驗室進行培養。

準確地說，細胞在沒有粘附壁的情況下生長後會變成圓形。

細胞附著的原理是細胞能夠產生粘附在培養皿表面的粘附分子。 當酶處理或培養皿表面發生變化時，粘附分子被破壞，細胞失去粘附力，然後細胞由於表面張力而變成球形。

體外培養細胞的重要生長特徵包括粘附和拉伸，以及接觸抑制和生長的密度限制。 粘附和拉伸是大多數體外培養細胞的基本生長特徵。

雖然淋巴細胞等血細胞不傾向於在體內聚集，並且可以在體外懸浮中生長，但大多數哺乳動物細胞在體內和體外生長，其底物可以是其他細胞、膠原蛋白、玻璃或塑料。 培養的細胞在附著在基質上之前通常呈球狀; 當附著在基質上時，細胞會逐漸伸展形成一定的形狀，呈成纖維細胞樣或上皮樣。 電池與基板的附著不是乙個能源密集型過程，並且被認為與電荷有關。

根據資料，在37小時內，細胞之間可以在2分鐘內形成鍵，這種鍵可以作用於胰蛋白酶，並且只發生在細胞之間，而不發生在細胞和底物之間。 形成穩定的粘合需要 8 分鐘。

一些特殊的細胞附著促進物質（如層粘連蛋白、纖連蛋白、III型膠原、血清擴增因子等）可能參與細胞附著過程。 這些細胞附著因子是存在於細胞膜表面或培養液（尤其是血清）中的蛋白質。 在培養過程中，這些帶正電荷的粘附促進劑首先被吸附在基質上，然後將懸浮的圓形細胞附著在被粘附促進劑吸附的基質上，細胞將拉伸成原來的形態。

一般來說，已經脫離底物的貼壁生長細胞不能長時間懸浮生長，會逐漸變性，除非是轉化細胞或惡性腫瘤細胞。

細胞之所以能粘附生長，是因為細胞表面可以表達與周圍環境強烈結合的蛋白質，例如粘附分子，而這些粘附分子的表達受到其他蛋白質的影響，也就是你所說的粘附因子。 如果培養基中沒有貼壁因子，則細胞不表達粘附分子，細胞不能貼壁生長。

1.細胞單獨用胰蛋白酶消化，消化後的細胞易形成團塊，吹氣後不易變成單細胞，消化時間要掌握和控制，容易浮起;

2.用（w v）胰蛋白酶-mm乙胺四乙酸乙胺四乙酸溶液消化，感覺應該在幾秒鐘的時間內消化完畢，而且處理速度應該很快，我曾經丟棄過胰蛋白酶後，幾乎看不到細胞，使用丁香海豚的胰蛋白酶+乙二胺四乙酸可能是更好的方法;

3.我感覺在牆上不是特別強壯，一般在一代後傳芹菜大隊8到10個小時。 瓶子可能很傻，這是乙個問題，我用了乙個玻璃瓶，它沒有單獨塗佈，也許用聚賴氨酸塗層會更好。

細胞在沒有培養基的情況下在貼壁生長後不久死亡，但如果冷凍，可以儲存很長時間。

在沒有營養的情況下，它應該很快就會死亡。

考慮到細胞生長和增殖需要空間，你這樣做是正確的，當沒有空間時，細胞就會停止生長。

細胞密集傳遞，10%的血清就足夠了。 沒關係。

培養基中可能有細菌，或者沒有殺菌。