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小鼠胰島內皮細胞的傳代培養及其程式。
原代細胞培養成功後,需要分離培養,否則細胞會因生存空間不足或密度過大而受到影響,營養失調會影響細胞生長。 將細胞從原始燒瓶中分離並稀釋,然後轉移到新燒瓶中進行培養的過程稱為傳代培養。 傳代細胞允許培養細胞擴增(細胞系的形成),可以轉殖,並且易於儲存,但可能會失去一些特殊的細胞和分化特性。
亞定植細胞形成細胞系的最大優點是它們提供了大量易於實驗的長效實驗材料。
1.程式。
1)將舊培養液吸出或倒入培養瓶中。
2)在瓶中加入少量胰蛋白酶溶液和EDTA混合物。建議蓋住培養瓶的底部。
3)放入37培養箱或室溫(25°C)進行消化,2 5min後,將培養瓶置於倒置顯微鏡下觀察,當發現胞質溶膠回縮時,細胞空間增加,應立即停止消化。
4)吸出消化液,在瓶中加入少量漢克斯液,輕輕轉動培養瓶,洗去殘留的消化液,然後加入培養液。如果僅使用胰蛋白酶消化,則可在吸入胰蛋白酶溶液後直接加入少量含血清培養物以終止消化。
5)使用肘部移液管,吸出瓶中的培養基,輕輕反覆吹瓶壁上的細胞,以使其與瓶壁分離,形成細胞懸液。應使用輕柔的筆觸來防止細胞因用力過猛而受損。
6)用計數板計數後,將它們接種在新的燒瓶中,並置於CO 2培養箱中進行培養。
7)細胞培養補料時間應根據細胞生長狀態和實驗要求確定。一般來說,生長液應在2-3天後更換一次。 當細胞散布在容器的底面上時,可以使用它們; 也可以繼續亞傳代,擴大培養,或改變維持溶液。
2.預防 措施。
1)掌握細胞消化時間,當消化時間過短時,細胞不應從瓶壁上脫落,消化時間過長會導致細胞脫落和損傷。
2)掌握消化濃度,當消化液濃度過高時,應縮短消化時間,當濃度過低時,細胞消化時間應相對較長。
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古細菌,也稱為古細菌,是一類非常特殊的細菌,生活在極端的生態環境中。 它具有原核生物的某些特徵,例如沒有核膜和內膜系統; 還有真核生物特徵,例如與蛋氨酸開始蛋白質合成,核醣體對氯黴素不敏感,RNA聚合酶與真核細胞的相似性,DNA中存在內含子和結合組蛋白; 此外,它還具有不同於原核細胞和真核細胞的特徵,例如:
細胞膜中的脂質是不可皂化的; 細胞壁不含肽聚醣,有的以蛋白質為基礎,有的含有雜多醣,有的與肽聚醣相似,但均不含胞壁酸、D型氨基酸、二氨基庚烷酸。
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特點:人類惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞; NK-92MI [NK92MI]NK-92 是一種白細胞介素 2 依賴性 NK 細胞系,來源於一名患有快速進展性非霍奇金淋巴瘤的 50 歲白人男性的外周血單核細胞。 NK-92MI 是一種源自 NK-92 的轉染非依賴性 IL-2 的 NK 細胞系,親本細胞通過微粒體基因轉化與逆轉錄病毒 MFG-HIL-2 載體攜帶的人 IL-2 cDNA 進行轉化。可能是由於載體整合到基因組DNA中,轉化是穩定的。
這種細胞株對許多惡性細胞具有細胞毒性; 鉻釋放試驗表明,它能殺死 K562 和 Daudi 細胞。 NK-92細胞具有以下特徵:CD2、CD7、CD11A、CD28、CD45、CD5
培養條件 MEM:α 最低必需培養基(含核苷)馬血清,; 優質胎牛血清,傳代方法可在幾天內飽滿。
通行情況。 冷凍儲存條件 基礎培養基 + 5% DMSO + 20% FBS 該公司銷售的細胞有原代細胞、傳代細胞和非細胞系。 細胞受到嚴格控制。
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細胞名稱 – 4T1 小鼠乳腺癌細胞。
描述—4T1 是一種 6-硫鳥嘌呤抗性細胞系,從腫瘤菌株中獲得,無需誘變。 當注射到BALBC小鼠體內時,4T1會自發產生高度轉移的腫瘤,這些腫瘤可以轉移到肺、肝臟、淋巴結和大腦,同時在注射部位形成起源病灶。 誘導轉移不需要切除原發病灶。
BALBC小鼠中4T1細胞的生長和轉移特徵與人類乳腺癌非常相似。 該腫瘤是人類 VI 期乳腺癌的動物模型。 4T1誘導的腫瘤轉移在術後和非手術環境中具有相似的動力學,可用作術後和非手術模型。
與其他腫瘤模型相比,由於 4T1 的抗 6-硫鳥嘌呤特性,可以在許多遠端器官中檢測到小的轉移細胞團塊(低至 1 個)。
動物種類 – 小鼠。
組織** – 乳腺癌。
形態學 – 上皮細胞。
培養基和新增劑 – RPMI-1640 (Gibco, Cat.31800022號,NaHCO3,葡萄糖,丙酮酸鈉,90%;優質胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%; 二氧化碳,5%。
溫度:37攝氏度。
**限制 - 僅用於研究目的。
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你可以問我們,不要問。
1.要求客戶在相同條件下使用培養基進行細胞培養。 可以收集燒瓶中多餘的培養基以備後用,在傳代過程中,細胞可以與客戶自己的培養基按一定比例混合,使細胞逐漸適應培養條件。
2.建議客戶在收到電芯後的前3天內拍幾張電芯**的照片,記錄電芯狀態,方便與技術部門溝通。 由於運輸原因,個別敏感電池會不穩定,請及時與我們聯絡,告知我們電池的具體情況,以便我們的技術人員跟進並返回,直到問題得到解決。
3.這些細胞只能用於科學研究。
HLX0012 我沒有太多這種電池的庫存。
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HLX0003此單元,我們一般在發貨後提供說明。
我們先來看看注意事項。
2.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞的相關資訊,如細胞形態、使用的培養基、血清配比、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。 如果由於培養條件不一致而導致細胞出現問題,則責任是客戶的責任。
3.用75%酒精擦拭細胞瓶表面,在顯微鏡下觀察細胞狀態。 由於運輸問題,少量貼壁細胞會從瓶壁上脫落,將細胞置於培養箱中孵育4-6小時,然後取出觀察。
此時,大多數細胞都會貼壁,如果細胞仍未貼壁,則使用台盼藍染色測量細胞活力,如果確認細胞活力正常,請將細胞離心,再次使用新鮮培養基進行貼壁培養; 如果染色結果顯示細胞無法存活,請拍下**的照片並及時與我們聯絡,資訊確認後我們將免費再次傳送給您。
4.待細胞粘附壁後,請倒出細胞瓶中的培養基,留出6 8ml以維持細胞的正常培養,當細胞匯合度約為80%時,細胞正常通過。
總結。 你好! <>
員工問卷內容不夠詳細的原因 問卷通常由引言、正文和結論三部分組成。 問卷的前言主要是對調查的目的、意義和要求進行說明,包括問卷的標題、調查的描述和填寫表格的要求。 >>>More